在無(wú)水氯化銅廠家的實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞是所有實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中,總是會(huì)有這樣的麻煩。在下列情況下,你如何解決它?
如何判斷細(xì)胞污染?
1:細(xì)胞培養(yǎng)液變渾濁,常見(jiàn)是湯黃色液體,一般認(rèn)為是細(xì)菌污染。
2:含有黑色斑點(diǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)基,通常被認(rèn)為是黑蟲。
狀態(tài)3:細(xì)胞培養(yǎng)基清晰,但在培養(yǎng)液中可以看到帶有毛發(fā)的銀耳狀物質(zhì),可能是真菌感染。
對(duì)策:直接將細(xì)胞污染拋出來(lái),用酒精和棉球?qū)⒎趸飨麥?,用紫外線照射半小時(shí),防止再次污染。同時(shí),在細(xì)胞培養(yǎng)中,青霉素(特別是初學(xué)者)加入到培養(yǎng)基中。
在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中,細(xì)胞周圍的細(xì)胞周圍有許多小黑點(diǎn)。你怎么做的?
策略1:胰蛋白酶消化后很短時(shí)間,低速離心,不同的實(shí)驗(yàn)室不一樣,如果你是1000到5分鐘,它可以改為700~3分鐘,培養(yǎng)的細(xì)胞用新培養(yǎng)瓶,細(xì)胞收集是少一點(diǎn),但一般可以清洗很多。過(guò)幾代要好得多。
策略2:如果多次嘗試后不干凈,是否有支原體污染值得懷疑,OK用于預(yù)防支原體感染。一般3~5天細(xì)胞干凈。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,貼壁細(xì)胞表面出現(xiàn)了許多死亡細(xì)胞。他們?cè)谖恼轮惺侨绾伪淮蚱频模?/div>
有一次測(cè)試,之后又用PBS洗兩次,加胰蛋白酶在搖,然后PBS將很快被倒出,洗凈,加胰酶消化正常。死細(xì)胞由于粘附能力弱,胰蛋白酶的次加入會(huì)下降,胰蛋白酶的第二個(gè)細(xì)胞是更活躍的細(xì)胞。整個(gè)時(shí)間后,子代的方法是一樣的。2~3次后,細(xì)胞狀況良好。
細(xì)胞胞質(zhì)疏松,狀態(tài)不好,不能提高,怎么辦?
策略1:在正常情況下,有必要將血清從血清轉(zhuǎn)為血清或增加血清濃度,將血清濃度提高到15%~20%,培養(yǎng)48 h,然后改變?yōu)檎5?0%濃度。
策略2:血清開始后還可采取提高細(xì)胞密度的方法,從培養(yǎng)瓶到板12孔板、細(xì)胞密度、細(xì)胞因子分泌、腫瘤細(xì)胞通過(guò)旁分泌途徑促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。
預(yù)防策略:胞漿疏松,老化是由于細(xì)胞數(shù)量較多,胰蛋白酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),此時(shí)必須控制細(xì)胞數(shù),注意胰蛋白酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),胰蛋白酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),易導(dǎo)致狀態(tài)不佳和胞漿疏松。有一個(gè)竅門,袁元從沒(méi)試過(guò),你可以試著把細(xì)胞凍在時(shí)間里,恢復(fù),細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)得更好。
這些細(xì)胞是如何在文化中長(zhǎng)期存在的?
許多人會(huì)遇到如何處理從其他地方購(gòu)買細(xì)胞或通過(guò)快遞來(lái)表達(dá)細(xì)胞的問(wèn)題,以及用培養(yǎng)瓶填充細(xì)胞的問(wèn)題。
步是將37℃的培養(yǎng)箱放置4小時(shí),這樣細(xì)胞可以在長(zhǎng)途跋涉后穩(wěn)定下來(lái)并觀察細(xì)胞狀態(tài)。
第二步:將新鮮培養(yǎng)基和舊培養(yǎng)基稀釋1:1的細(xì)胞,如果條件不好,血清濃度為15%,否則正常訓(xùn)練,所以有一個(gè)過(guò)渡期,而不是細(xì)胞處于血清狀態(tài)差后,48小時(shí)后變?yōu)檎Q迮囵B(yǎng)濃度15%。