在無水氯化銅廠家的實驗中,細胞是所有實驗的基礎(chǔ)。在腫瘤細胞培養(yǎng)的過程中,總是會有這樣的麻煩。在下列情況下,你如何解決它?
如何判斷細胞污染?
1:細胞培養(yǎng)液變渾濁,常見是湯黃色液體,一般認為是細菌污染。
2:含有黑色斑點的細胞培養(yǎng)基,通常被認為是黑蟲。
狀態(tài)3:細胞培養(yǎng)基清晰,但在培養(yǎng)液中可以看到帶有毛發(fā)的銀耳狀物質(zhì),可能是真菌感染。
對策:直接將細胞污染拋出來,用酒精和棉球?qū)⒎趸飨麥?,用紫外線照射半小時,防止再次污染。同時,在細胞培養(yǎng)中,青霉素(特別是初學者)加入到培養(yǎng)基中。
在細胞培養(yǎng)的過程中,細胞周圍的細胞周圍有許多小黑點。你怎么做的?
策略1:胰蛋白酶消化后很短時間,低速離心,不同的實驗室不一樣,如果你是1000到5分鐘,它可以改為700~3分鐘,培養(yǎng)的細胞用新培養(yǎng)瓶,細胞收集是少一點,但一般可以清洗很多。過幾代要好得多。
策略2:如果多次嘗試后不干凈,是否有支原體污染值得懷疑,OK用于預(yù)防支原體感染。一般3~5天細胞干凈。
在細胞培養(yǎng)過程中,貼壁細胞表面出現(xiàn)了許多死亡細胞。他們在文章中是如何被打破的?
有一次測試,之后又用PBS洗兩次,加胰蛋白酶在搖,然后PBS將很快被倒出,洗凈,加胰酶消化正常。死細胞由于粘附能力弱,胰蛋白酶的次加入會下降,胰蛋白酶的第二個細胞是更活躍的細胞。整個時間后,子代的方法是一樣的。2~3次后,細胞狀況良好。
細胞胞質(zhì)疏松,狀態(tài)不好,不能提高,怎么辦?
策略1:在正常情況下,有必要將血清從血清轉(zhuǎn)為血清或增加血清濃度,將血清濃度提高到15%~20%,培養(yǎng)48 h,然后改變?yōu)檎5?0%濃度。
策略2:血清開始后還可采取提高細胞密度的方法,從培養(yǎng)瓶到板12孔板、細胞密度、細胞因子分泌、腫瘤細胞通過旁分泌途徑促進細胞生長。
預(yù)防策略:胞漿疏松,老化是由于細胞數(shù)量較多,胰蛋白酶消化時間過長,此時必須控制細胞數(shù),注意胰蛋白酶消化時間過長,胰蛋白酶消化時間過長,易導(dǎo)致狀態(tài)不佳和胞漿疏松。有一個竅門,袁元從沒試過,你可以試著把細胞凍在時間里,恢復(fù),細胞會長得更好。
這些細胞是如何在文化中長期存在的?
許多人會遇到如何處理從其他地方購買細胞或通過快遞來表達細胞的問題,以及用培養(yǎng)瓶填充細胞的問題。
步是將37℃的培養(yǎng)箱放置4小時,這樣細胞可以在長途跋涉后穩(wěn)定下來并觀察細胞狀態(tài)。
第二步:將新鮮培養(yǎng)基和舊培養(yǎng)基稀釋1:1的細胞,如果條件不好,血清濃度為15%,否則正常訓(xùn)練,所以有一個過渡期,而不是細胞處于血清狀態(tài)差后,48小時后變?yōu)檎Q迮囵B(yǎng)濃度15%。