在無水氯化銅廠家的實驗中，細(xì)胞是所有實驗的基礎(chǔ)。在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，總是會有這樣的麻煩。在下列情況下，你如何解決它？

 

如何判斷細(xì)胞污染？

 

1：細(xì)胞培養(yǎng)液變渾濁，常見是湯黃色液體，一般認(rèn)為是細(xì)菌污染。

 

2：含有黑色斑點的細(xì)胞培養(yǎng)基，通常被認(rèn)為是黑蟲。

 

狀態(tài)3：細(xì)胞培養(yǎng)基清晰，但在培養(yǎng)液中可以看到帶有毛發(fā)的銀耳狀物質(zhì)，可能是真菌感染。

 

對策：直接將細(xì)胞污染拋出來，用酒精和棉球?qū)⒎趸飨麥?，用紫外線照射半小時，防止再次污染。同時，在細(xì)胞培養(yǎng)中，青霉素（特別是初學(xué)者）加入到培養(yǎng)基中。

 

在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，細(xì)胞周圍的細(xì)胞周圍有許多小黑點。你怎么做的？

 

策略1：胰蛋白酶消化后很短時間，低速離心，不同的實驗室不一樣，如果你是1000到5分鐘，它可以改為700～3分鐘，培養(yǎng)的細(xì)胞用新培養(yǎng)瓶，細(xì)胞收集是少一點，但一般可以清洗很多。過幾代要好得多。

 

策略2：如果多次嘗試后不干凈，是否有支原體污染值得懷疑，OK用于預(yù)防支原體感染。一般3～5天細(xì)胞干凈。

 

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，貼壁細(xì)胞表面出現(xiàn)了許多死亡細(xì)胞。他們在文章中是如何被打破的？

 

有一次測試，之后又用PBS洗兩次，加胰蛋白酶在搖，然后PBS將很快被倒出，洗凈，加胰酶消化正常。死細(xì)胞由于粘附能力弱，胰蛋白酶的次加入會下降，胰蛋白酶的第二個細(xì)胞是更活躍的細(xì)胞。整個時間后，子代的方法是一樣的。2～3次后，細(xì)胞狀況良好。

 

細(xì)胞胞質(zhì)疏松，狀態(tài)不好，不能提高，怎么辦？

 

策略1：在正常情況下，有必要將血清從血清轉(zhuǎn)為血清或增加血清濃度，將血清濃度提高到15%～20%，培養(yǎng)48 h，然后改變?yōu)檎５?0%濃度。

 

策略2：血清開始后還可采取提高細(xì)胞密度的方法，從培養(yǎng)瓶到板12孔板、細(xì)胞密度、細(xì)胞因子分泌、腫瘤細(xì)胞通過旁分泌途徑促進(jìn)細(xì)胞生長。

 

預(yù)防策略：胞漿疏松，老化是由于細(xì)胞數(shù)量較多，胰蛋白酶消化時間過長，此時必須控制細(xì)胞數(shù)，注意胰蛋白酶消化時間過長，胰蛋白酶消化時間過長，易導(dǎo)致狀態(tài)不佳和胞漿疏松。有一個竅門，袁元從沒試過，你可以試著把細(xì)胞凍在時間里，恢復(fù)，細(xì)胞會長得更好。

 

這些細(xì)胞是如何在文化中長期存在的？

 

許多人會遇到如何處理從其他地方購買細(xì)胞或通過快遞來表達(dá)細(xì)胞的問題，以及用培養(yǎng)瓶填充細(xì)胞的問題。

 

步是將37℃的培養(yǎng)箱放置4小時，這樣細(xì)胞可以在長途跋涉后穩(wěn)定下來并觀察細(xì)胞狀態(tài)。

 

第二步：將新鮮培養(yǎng)基和舊培養(yǎng)基稀釋1:1的細(xì)胞，如果條件不好，血清濃度為15%，否則正常訓(xùn)練，所以有一個過渡期，而不是細(xì)胞處于血清狀態(tài)差后，48小時后變?yōu)檎Ｑ迮囵B(yǎng)濃度15%。